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真菌毒素的剖析和真菌毒素分析方案

發表時間:2025-07-03
  真菌毒素在自然界中廣泛存在,有數據統計,全世界每年約有25%的食物受到不同程度的真菌毒素污染,每年由于霉變污染導致真菌毒素引起的農產品和工業原料的損失達數百億美元。由此可見,真菌毒素會對谷物類食品的生產者和消費者造成巨大損害。我國谷物霉變主要發生在長江以南地區,每年約使糧食減產3%~7%。據調查,除糧食、飼料外,在油料作物、種子、水果、干果、蔬菜、調味品、煙草、麻類、乳和乳制品、發酵產品中都發現了不同程度的真菌毒素,其引起的疾病及傷害可以說給人們帶來了巨大的人員傷亡和財產損失。

1 什么是真菌毒素
真菌毒素是真菌在適宜溫度、濕度條件下產生的次級代謝產物,在糧食和飼料衛生安全領域又俗稱為霉菌毒素。真菌為喜好氧氣的微生物,在厭氧條件下幾乎不能生存,因此谷物貯存時使用抽真空或充氮氣等方法都能有效避免真菌毒素的滋生。目前,己經分離和鑒定出400多種真菌毒素,而在糧食行業中最常見的真菌毒素主要有4種,即黃曲霉毒素、玉米赤霉烯酮、嘔吐毒素和赫曲霉毒素A。

2 來源及特點

2.1 真菌毒素的來源
真菌毒素的來源大體可分為兩個部分,即收獲前真菌毒素的來源與收獲后真菌毒素的來源。

2.1.1 收獲前真菌毒素的來源
任何生長中的農作物,包括飼草和谷物等,都容易在受到真菌污染時產生真菌毒素。真菌在隨農作物由田間向飼料加工廠再向飼料槽的轉換過程中可能不會存活,即使有些真菌毒素被完整地保留下來,但飼料原料看上去顏色及外觀都不錯,常見指標檢測分析結果也不錯,而往往就是這些“不錯”的原料可能早就已經成為真菌毒素的避風港。

2.1.2 收獲后真菌毒素的來源
收獲后的農作物如果其貯存、運輸、加工、保藏的外部環境滿足真菌的生長條件,則真菌會繼續生長產毒。糧食飼料在收獲時未被充分干燥或貯運過程中溫/濕度過高,糧食飼料上污染的真菌就會迅速生長,此時真菌毒素會一直積累疊加,最終危害動物機體而不自知。

2.2 真菌毒素的特點

2.2.1 高效性
較低毒素濃度(μg/kg)的真菌毒素即能產生明顯毒性。在污染比較嚴重的幾種真菌毒素中,黃曲霉毒素B1(AFB1)具有強毒性——是氰化鉀的10倍、砒霜的68倍,被世界衛生組織的腫瘤研究機構列為Ⅰ類致癌物質。然而,AFB1的存在極為普遍——在農作物和飼料中廣泛存在,其主要損害肝臟功能并具有強烈的致癌、致畸、致突變作用,能引起肝癌,甚至誘發骨癌、腎癌、直腸癌、乳腺癌、卵巢癌等。

2.2.2 高穩定性
低分子化合物非常穩定,可耐高溫。黃曲霉素具有較為穩定的化學性質,對熱不敏感——即便在100℃下暴露20小時也不能將其完全去除,只有在280℃以上的高溫下才能被破壞。

2.2.3 富集性
真菌毒素所具有的抗化學生物制劑及物理滅活作用可以幫助其在生物鏈中不斷傳播、富集——原本殘留在土壤中的真菌毒素會被后來種植的谷物吸收,從而引起更多真菌毒素污染及感染的問題。

2.2.4 特異性
分子結構不同,毒性相差較大。如黃曲霉毒素族有黃曲霉毒素B1、B2、M1、M2,各毒素的毒性均不同。

2.2.5 相加性
兩種以上的真菌毒素混合在一起造成的傷害遠超單一毒素產生毒害作用的總和。由于農作物可能被幾種真菌共同污染,因此飼料中可能同時存在多種真菌毒素。

2.2.6 污染地域性
動物飼料及農產品中真菌毒素的產生具有一定的地域性。例如,熱帶和亞熱帶區域是曲霉菌生長的最佳環境。盡管如此,飼料和農產品貿易的全球化導致真菌毒素在全世界范圍內傳播。

2.2.7 隱蔽性
真菌毒素檢測時常受到小分子物質(如糖苷、葡糖苷酸、脂肪酸酯和蛋白質)的掩蓋,這些小分子物質與真菌毒素結合在一起,導致檢測值顯示為錯誤的陰性結果。最終,這些被掩蓋的真菌毒素不能被傳統的分析方法檢測出來。但這些結合到真菌毒素上的分子可能在消化過程中被解除,從而釋放出真菌毒素,危害動物及人體健康。

3 四種常見的真菌毒素

3.1 黃曲霉毒素
黃曲霉毒素是一類由黃曲霉和寄生曲霉產生的次級代謝產物,性質較為穩定,溶點為268~269℃,高溫下可穩定存在,常規加熱和巴氏殺菌均不能將其有效去除。已知的黃曲霉毒素有20多種,包括直接由真菌代謝產生的AFB1、AFB2、AFG1和AFG2,以及集體攝入黃曲霉毒素后所代謝產生的AFM1和AFM2。其中,以AFB1最為常見且毒性最強——是迄今為止已知毒性最強的物質之一。

3.2 嘔吐毒素
脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON),主要由禾谷鐮刀菌、黃色鐮刀菌和燕麥鐮刀菌產生,是單端孢霉烯B族毒素。

3.3 玉米赤霉烯酮
玉米赤霉烯酮(ZEN)是由多種鐮刀菌(主要由禾谷鐮刀產生)在代謝過程中產生的一種非類固醇結構產物。此外,玉米赤霉烯酮在許多高等植物體內存在,并作為植物體內的一種激素來調控植物的生長,例如小麥、大豆、棉花等在開花時玉米赤霉烯酮也達到峰值。

3.4 赭曲霉毒素A
赭曲霉毒素是由曲霉屬和青霉屬的某些霉菌結合產生的真菌毒素,主要有7種結構類似物,分別是赭曲霉毒素A、赭曲霉毒素B、赭曲霉毒素C、赭曲霉毒素D、甲酯化的赭曲霉毒素A及甲酯化或乙酯化的赭曲霉毒素B。從對谷物的污染率、污染水平及對人畜的毒性考慮,赭曲霉毒素A是其中最重要的且具有衛生學意義的霉菌代謝產物。

4.真菌毒素檢測方法及方案分析:
4.1 膠體金檢測試紙條
膠體金檢測試紙條具備操作簡單、檢測時間短、不需要儀器設備進行結果讀取的優點;但其只能進行定性或半定量檢測,靈敏度相對較低,且結果判定易受主觀因素影響。膠體金檢測卡適用于大批量樣本的初次篩選。

4.2 酶聯免疫吸附檢測試劑盒
酶聯免疫吸附檢測試劑盒的操作相對復雜, 檢測結果易受人為操作影響,且檢測時間長(>30min),不適用于少量樣本的檢測(成本高、耗時長)。但該產品靈敏度相對較高,可借助于酶標儀讀取并計算得到定量的檢測數據,適用于大批量樣本的同時檢測。

4.3 真菌毒素熒光定量快速檢測系統
根據糧食安全監測工作的實際需要,按照簡單、快速、準確、便攜和經濟等原則,深芬儀器真菌毒素分析儀實現了“樣品采集-樣本處理-真菌毒素提取-定量檢測-數據實時上傳”一體化完成整合。真菌毒素分析儀能夠快速定量檢測糧食、飼料、谷物、食用油、調味品等食品中T2毒素、嘔吐毒素、赭曲霉毒素、伏馬毒素、玉米赤霉烯酮等真菌毒素含量。真菌毒素分析儀適用于糧油監測中心、糧油飼料生產加工、食品加工貿易、畜禽養殖戶自查、質監部門用于市場快速篩查等。

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